• Реклама

  • Реклама


  • Новости сайта
  • "РУКОВОДСТВО ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА И БЕЗОПАСНОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК К ПИЩЕ. РУКОВОДСТВО. Р 4.1.1672-03" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 30.06.2003)

    Страница 11


    Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | ... Последняя» |


    ----------------------------+------------------------------------¬
    ¦   Компоненты, мешающие    ¦    Устранение влияния мешающих     ¦
    ¦        определению        ¦             компонентов            ¦
    +---------------------------+------------------------------------+
    ¦Диоксид серы (SO2)         ¦В экстракт добавляют объем ацетона, ¦
    ¦                           ¦равный 1/5 части массы навески      ¦
    +---------------------------+------------------------------------+
    ¦Наличие ионов двухвалентных¦Экстрагирование проводят смешивая   ¦
    ¦            2+    2+    2+ ¦равные объемы 0,18% раствора ЭДТА и ¦
    ¦металлов (Fe  , Cu  , Sn   ¦6% раствора метафосфорной кислоты   ¦
    ¦и др.)                     ¦(3% раствора ТХУ)                   ¦
    +---------------------------+------------------------------------+
    ¦Высокое содержание жира    ¦Использование в качестве            ¦
    ¦                           ¦экстрагирующего агента смеси 6%     ¦
    ¦                           ¦раствора метафосфорной кислоты и    ¦
    ¦                           ¦ацетона в соотношении 1:3           ¦
    +---------------------------+------------------------------------+
    ¦Жирорастворимые витамины в ¦Аналитическую пробу исследуемого БАД¦
    ¦составе "жировых" капсул   ¦перед проведением экстракции следует¦
    ¦                           ¦предварительно растворить в неболь- ¦
    ¦                           ¦шом объеме органического растворите-¦
    ¦                           ¦ля (эфир, хлороформ, гексан)        ¦
    +---------------------------+------------------------------------+
    ¦Восстанавливающие сахара   ¦Обработка экстракта формалином при  ¦
    ¦(редуктоны)                ¦pH 3,5 приводит к полной дезактива- ¦
    ¦                           ¦ции АК, при pH 0 - редуктонов       ¦
    +---------------------------+------------------------------------+
    ¦Сульфгидрильные соединения ¦Обработка экстракта 5% раствором    ¦
    ¦(цистеин, глутатион        ¦уксуснокислого свинца               ¦
    ¦восстановленный, белки,    ¦                                    ¦
    ¦танин и т.п.)              ¦                                    ¦
    +---------------------------+------------------------------------+
    ¦Наличие в исследуемом      ¦В процессе экстрагирования следует  ¦
    ¦образце большого количества¦добавить к объекту исследования 2 - ¦
    ¦зерновых                   ¦5 куб. СМ метанола                  ¦
    L---------------------------+-------------------------------------

    Приготовление экстрагирующего раствора

    Приготовление водного раствора соляной кислоты массовой концентрации 20 г/куб. дм (2%)

    47,5 куб. СМ 36%-ной соляной кислоты доводят до метки в 1000 куб. СМ мерной колбе дистиллированной водой.

    Приготовление водного раствора трихлоруксусной кислоты массовой концентрации 30 г/куб. дм (3%)

    30 г кристаллической трихлоруксусной кислоты доводят до метки в 1000 куб. СМ мерной колбе дистиллированной водой.

    Приготовление водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/куб. дм

    Взвешивают 60,00 г растертой в ступке метафосфорной кислоты на весах 4-го класса точности, растворяют без нагревания в 100 - 200 куб. СМ дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 куб. см, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и фильтруют. Раствор хранят при (6 +/- 2) °С не более 7 сут.

    Приготовление водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/куб. дм

    Необходимый для измерения объем водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/куб. дм смешивают с дистиллированной водой в соотношении 1:1. Раствор готовят непосредственно перед применением.

    Приготовление водного раствора трилона Б (этилендиаминтетраацетат натрия) молярной концентрации с = 0,05 моль/куб. дм

    Взвешивают 1,8 г трилона Б на весах 2 класса точности и растворяют в 100 - 300 куб. СМ дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 куб. см, доливая дистиллированную воду до метки.

    Приготовление смеси водного раствора трилона Б (этилендиаминтетраацетат натрия) молярной концентрации с = 0,05 моль/куб. дм и раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/куб. дм или раствора трихлоруксусной кислоты массовой концентрации 30 г/куб. дм (раствор осадителя)

    Отмеряют цилиндром 300 куб. СМ водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/куб. дм (или водного раствора трихлоруксусной кислоты массовой концентрации 30 г/куб. дм) и 300 куб. СМ раствора трилона Б (этилендиаминтетраацетат натрия) молярной концентрации с = 0,05 моль/куб. дм в коническую колбу объемом 750 куб. СМ и перемешивают. Раствор готовят непосредственно перед применением.

    Приготовление смеси уксусной и метафосфорной кислот

    К раствору 15 г метафосфорной кислоты в 200 куб. СМ дистиллированной воды добавляют 40 куб. СМ ледяной уксусной кислоты и доводят дистиллированной водой до 500 куб. см. Хранят в склянке с притертой пробкой в холодильнике в течение 7 дней.

    Приготовление стандартного раствора АК

    Растворяют 0,1000 г (точная навеска) аскорбиновой кислоты, отвечающей требованиям ГФ XI, в мерной колбе емкостью 100 куб. СМ в выбранном экстрагирующем растворе и доводят тем же раствором до метки, 10 куб. СМ полученного раствора АК помещают в мерную колбу на 100 куб. СМ и доводят до метки раствором, используемым в качестве экстрагирующего. Раствор готовят непосредственно перед применением.

    Приготовление раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (раствор красителя) и определение его титра

    Взвешивают 0,100 г 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия на весах 2 класса точности, растворяют, тщательно перемешивая, в 250 куб. СМ свежекипяченой дистиллированной воды температурой (90 +/- 5) °С, содержащей около 50 мг бикарбоната натрия. После охлаждения раствора до (20 +/- 5) °С доводят до метки дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 500 куб. см, затем фильтруют через складчатый фильтр в склянку из темного стекла. Раствор хранят при (6 +/- 2) °С не более 1 месяца.

    Определение титра

        К 1 мл стандартного раствора АК добавляют 9 куб. СМ выбранного
    экстрагирующего       раствора       и      титруют      раствором
    2,6-дихлорфенолиндофенолята  натрия  до  розового  окрашивания, не
    исчезающего  в течение 15 - 20 с (V ). Таким же образом титруют 10
                                       т
    куб.  СМ  экстрагирующего раствора (V ). Поправку к титру раствора
                                         к
    (Т)     в     мг     АК,     эквивалентных    1    мл     раствора
    2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, вычисляют по формуле:

                                      K
                              T = ---------,
                                  (V  - V )
                                    т    к

    где К - количество АК в 1 мл стандартного раствора, мг.

    Приготовление раствора ацетатного буфера с pH 4,0

    Растворяют 30 г безводного уксуснокислого натрия в 70 куб. СМ дистиллированной воды и, добавляя ледяную уксусную кислоту (около 100 куб. см), потенциометрически доводят pH до 4,0.

    Приготовление раствора ацетатного буфера с рH 5,0

    Растворяют 30 г безводного уксуснокислого натрия в 70 куб. СМ дистиллированной воды и, добавляя ледяную уксусную кислоту (около 50 куб. см), потенциометрически доводят pH до 5,0.

    Приготовление 1,0 М раствора соляной кислоты

    17,2 мл 36% соляной кислоты разбавляют дистиллированной водой в мерной колбе емкостью на 200 куб. СМ и доводят до метки дистиллированной водой.

    Приготовление 1,0 М раствора ацетата натрия

    82,0 г безводного ацетата натрия растворяют в мерной колбе емкостью 1000 куб. СМ дистиллированной водой и доводят до метки.

    Приготовление солянокислого буфера с pH 5,2

    К 40 куб. СМ 1,0 М раствора соляной кислоты приливают 200 куб. СМ 1,0 М раствора ацетата натрия и доводят до метки дистиллированной водой в мерной колбе емкостью 1000 куб. см.

    Проведение испытания

    Экстрагирование

        Для   приготовления   экстракта   рассчитанную  массу  навески
    взвешивают  с погрешностью +/- 0,0001 г. Затем гомогенизируют ее с
    небольшим  количеством  выбранного  экстрагирующего  агента. После
    чего  полученный  гомогенат количественно переносят в мерную колбу
    или  мерный  цилиндр объемом V   , доводят до метки экстрагирующим
                                  общ
    агентом,   тщательно  перемешивают,  настаивают  5  -  10  мин.  и
    фильтруют  через  складчатый фильтр или центрифугируют. Для жидких
    пищевых   добавок   необходимое  количество  материала  отмеривают
    пипеткой   и   доводят   до   метки   экстрагирующим   агентом   в
    соответствующей мерной колбе.

    Визуальное титрование

    Для определения АК 1 - 10 мл экстракта с общим содержанием АК около 0,1 мг вносят пипеткой в коническую колбу вместимостью 50 или 100 куб. см, доводят объем экстрагентом до 10 куб. СМ и титруют раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия до слабо-розового окрашивания, не исчезающего в течение 15 - 20 с. Аналогично титруют равный объем экстрагирующего агента (контроль на реактивы)*.

    Обработка результатов измерения

    Содержание АК (X), выраженное в мг на 1 г пищевой добавки, вычисляют по формуле:

                             T x (V  - V ) x V
                                   т    к     общ
                         X = --------------------,
                                   V   x m
                                    пр

        где:
        Т  - титр раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, мг/куб.
    см ;
        V    -   объем  раствора  2,6-дихлорфенолиндофенолята  натрия,
         т
    пошедший на титрование исследуемого раствора, куб. см;
        V    -   объем  раствора  2,6-дихлорфенолиндофенолята  натрия,
         к
    пошедший на контрольное испытание, куб. см;

    остальные обозначения см. выше.

    Для пищевых добавок, содержащих редуцирующие примеси, вместо контроля на реактивы проводят контрольное испытание на присутствие этих примесей. Для этого в колбу помещают такой же объем экстракта, как для определения АК, прибавляют равный ему объем ацетатного буферного раствора с pH 4,0, 36 - 40%-ный раствор формальдегида в объеме, равном половине объема буферного раствора, перемешивают и выдерживают в течение 10 мин., закрыв предварительно колбу пробкой. Затем содержимое титруют раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия.

    За окончательный результат принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений и не менее чем с двумя различными навесками, различающимися не более чем на 10%. Чувствительность визуального титрования составляет 5 мкг/куб. см.

    5.2. Определение витамина С в образцах,

    дающих окрашенные экстракты

    Флуориметрический метод определения

    Этот метод рассмотрен в "Руководстве по методам анализа качества и безопасности пищевых продуктов", 1998.

    Метод индофенол-ксилольной экстракции

    Этот метод рассмотрен в сборнике научных трудов "Теоретические и клинические аспекты науки о питании", т. VIII, 1987, с. 178 - 180.

    Колориметрический анализ АК в водной среде

    Приготовление экстракта и реактивов см. в п. 5.2.

    Проведение анализа. Готовят растворы в следующей последовательности (табл. 21).

    Таблица 21

    ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДОБАВЛЕНИЯ РЕАГЕНТОВ

    В КОЛОРИМЕТРИЧЕСКОМ МЕТОДЕ

    -----+----------------------+------------------------------------¬
    ¦N   ¦        Реагент       ¦         N раствора (колбы)         ¦
    ¦опе-¦                      +------+------+-------+------+-------+
    ¦ра- ¦                      ¦  1   ¦  1*  ¦   2   ¦  3   ¦  3*   ¦
    ¦ции ¦                      +------+------+-------+------+-------+
    ¦    ¦                      ¦конт- ¦проба ¦стан-  ¦экс-  ¦проба  ¦
    ¦    ¦                      ¦роль  ¦срав- ¦дарт   ¦тракт ¦сравне-¦
    ¦    ¦                      ¦      ¦нения ¦       ¦      ¦ния    ¦
    ¦    ¦                      ¦      ¦      ¦       ¦      ¦экс-   ¦
    ¦    ¦                      ¦      ¦      ¦       ¦      ¦тракта ¦
    +----+----------------------+------+------+-------+------+-------+
    ¦1   ¦Ацетатный буфер, pH   ¦2,5 мл¦2,5 мл¦2,5 мл ¦2,5 мл¦2,5 мл ¦
    ¦    ¦5,0*                  ¦      ¦      ¦       ¦      ¦       ¦
    +----+----------------------+------+------+-------+------+-------+
    ¦2   ¦Экстракт              ¦-     ¦-     ¦-      ¦5 мл  ¦5 мл   ¦
    +----+----------------------+------+------+-------+------+-------+
    ¦3   ¦Стандартный раствор АК¦-     ¦-     ¦0,5 мл ¦-     ¦-      ¦
    +----+----------------------+------+------+-------+------+-------+
    ¦4   ¦Экстрагирующий агент  ¦5 мл  ¦5 мл  ¦4,5 мл ¦-     ¦-      ¦
    ¦    ¦(3% НРО3 или 2% НСl)  ¦      ¦      ¦       ¦      ¦       ¦
    +----+----------------------+------+------+-------+------+-------+
    ¦5   ¦Дистиллированная вода ¦-     ¦2 мл  ¦-      ¦-     ¦2 мл   ¦
    +----+----------------------+------+------+-------+------+-------+
    ¦6   ¦Фенолят               ¦2 мл  ¦-     ¦2 мл   ¦2 мл  ¦-      ¦
    L----+----------------------+------+------+-------+------+--------

    При экстракции 2% НСl на анализ берут по 5 куб. СМ ацетатного буфера.

    При большой концентрации АК или интенсивной окраске экстракта берут меньше 5 куб. СМ экстракта, добавляя в растворы N 3 и 3* количество экстрагирующего агента, равное 5 куб. см, минус объем пробы. Измеряют поглощение фенолята (избытка) в пробах N 1 - 3 при лямбда = 540 нм.

    Содержание АК (X), выраженное в мг на 100 г исследуемого образца, рассчитывают по формуле:

                         K x (D  - D ) x V    x 100
                               1    3     общ
                     X = --------------------------,
                               D    x V   x m
                                1-2    пр

        где:
        К - количество АК в 0,5 куб. СМ стандартного раствора, взятого
    на определение, мг;
        D    - поглощение фенолята в контрольном растворе (N 1) против
         1-2
    поглощения фенолята в растворе стандарта (N 2);
        D   -  поглощение  фенолята в контрольном растворе N 1 (кювета
         1
    сравнения - раствор N 1*);
        D   -  поглощение  фенолята  в  растворе экстракта N 3 (кювета
         3
    сравнения - раствор N 3*);

    остальные обозначения приведены выше.

    За окончательный результат принимают среднее арифметическое двух определений.

    5.3. Спектрофотометрическое определение

    витамина С в напитках

    Проведение анализа

    После дегазации и, если необходимо, фильтрования исследуемых напитков готовят три раствора, добавляя реагенты в следующей последовательности (табл. 22).

    Таблица 22

    ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДОБАВЛЕНИЯ РЕАГЕНТОВ

    ПРИ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОМ ОПРЕДЕЛЕНИИ ВИТАМИНА С

    ------------------------------+----------------------------------¬
    ¦          Реагенты           ¦       Раствор N, куб. СМ         ¦
    ¦                             +------------+---------+-----------+
    ¦                             ¦     1      ¦    2    ¦     3     ¦
    ¦                             +------------+---------+-----------+
    ¦                             ¦контроль на ¦стандарт ¦исследуемый¦
    ¦                             ¦  реактивы  ¦         ¦  раствор  ¦
    +-----------------------------+------------+---------+-----------+
    ¦Солянокислый буфер (pH 5,2)  ¦5,0         ¦4,5      ¦4,5        ¦
    +-----------------------------+------------+---------+-----------+
    ¦Напиток                      ¦-           ¦-        ¦0,5        ¦
    +-----------------------------+------------+---------+-----------+
    ¦Стандартный раствор          ¦-           ¦0,5      ¦-          ¦
    ¦аскорбиновой кислоты         ¦            ¦         ¦           ¦
    +-----------------------------+------------+---------+-----------+
    ¦Раствор 2,6-дихлорфенолиндо- ¦1,0         ¦1,0      ¦1,0        ¦
    ¦фенолята натрия              ¦            ¦         ¦           ¦
    L-----------------------------+------------+---------+------------

    Измеряют поглощение фенолята (избытка) в пробах N 2 - 3 при лямбда = 540 нм.

    Содержание АК (X), выраженное в мг на 1 л напитка, рассчитывают по формуле:

                      K x D    x V      K x D    x 1000
                           1-3    общ        1-3
                  X = --------------- = ---------------,
                        D    x V          D    x 0,5
                         1-2    пр         1-2

        где:
        К - количество АК в 0,5 куб. СМ стандартного раствора, взятого
    на определение, мг;
        D     -  величина  поглощения исследуемого раствора N 3 против
         1-3
    поглощения фенолята в контроле на рективы;
        V     - общий объем исследуемого напитка, обычно его принимают
         общ
    равным 1000 куб. см;
        D     -  величина  поглощения стандартного раствора N 2 против
         1-2
    поглощения фенолята в контроле на рективы;
        V      -    объем    исследуемого    напитка,    взятый    для
         пр
    спектрофотометрирования, в данном случае - 0,5 куб. см.
        За   окончательный  результат  определения  принимают  среднее

    Страницы: | Стр.1 | Стр.2 | Стр.3 | Стр.4 | Стр.5 | Стр.6 | Стр.7 | Стр.8 | Стр.9 | Стр.10 | Стр.11 | Стр.12 | Стр.13 | Стр.14 | Стр.15 | Стр.16 | Стр.17 | Стр.18 | Стр.19 | Стр.20 | Стр.21 | Стр.22 | Стр.23 | Стр.24 | Стр.25 | Стр.26 | ... Последняя» |


    Архив правовых актов
  • Реклама
 
  • Реклама
  • Счетчики

  • Рейтинг@Mail.ru
  • Новости